Vie CONG. INTERN. REPROD. ANIM. INSEM. ARTIF., PARIS, 1968, VOL. II

NUKLEUS-GRÖSSE UND FEULGEN-DNS-GEHALT VON
NEBENHODEN- UND EJAKULAT-SPERMIEN DES KANINCHENS

S Paufler u: Kı H- Poote
Aus dem Tierärztlichen Institut der Universität Göt-
tingen, Germany, und dem Department of Animal Science,
Cornell Universität;-Ithaca,? New. York, . USA:

Technik und Material. Für die Untersuchungen standen
44 geschlechtsreife Kaninchenböcke der Rasse Holländer
Schecken, die während der Aufzucht- und Versuchspe-
riode unter gleichen Bedingungen gehalten wurden, zur
Verfügung. Vor der Entnahme der Spermaproben wurden

in regelmäßigen Abständen dreimal wöchentlich Samen
mit der künstlichen Scheide entnommen. Für die Unter-
suchungen der Kerngrößen und des DNS-Gehaltes wurden
jeweils Spermien vom letzten Ejakulat, vom Nebenhoden-
kopf und vom Nebenhodenschwanz auf Objektträger ausge-
strichen und nach Feulgen gefärbt.

Die Entnahme der Nebenhodenspermien geschah durch Her-
ausschneiden eines Gewebeteiles aus der Mitte des Ne-
benhodenkopfes und -schwanzes. Das Nebenhodengewebe
wurde in ein Reagenzröhrchen gebracht, 0,5 ml physio-
logische Kochsalzlösung zugegeben und mit einer

Schere mehrmals zerschnitten, damit die Samenzellen
freigesetzt werden konnten. Vom Ejakulat wurde 0,1 ml
des konzentrierten Spermas ebenfalls mit 0,5 ml
physiologischer Kochsalzlösung verdünnt. Ein Tropfen
der somit hergestellten Spermien-Suspension wurde

dann auf einen Objektträger gebracht und ausgestrichen.

Zur Feststellung der Kerngröße und des DNS-Gehaltes
ist die Feulgen-Färbung, modifiziert nach Swierstra
(2), durchgeführt worden. Die Fixierung der Ausstriche
in Carnoy's Lösung betrug dabe$ 7 Minuten und die Hy-
dolysezeit in 1 - = HCI bei 60 C genat8-Minuten,

Die gefärbten Samenzellen sind unter Bioloid mit einem
Deckglas abgedeckt worden.

Der Feulgen-DNS-Gehalt der Samenzellen-Kerne wurde

mit einem Mikrospektrophotometer gemessen. Genaue An-
gaben über die Zusammensetzung und die Arbeitsweise
des Gerätes sind von Paufler und Foote (1) gemacht
worden. Als Besonderheit ist zu vermerken, daß durch
Zwischenschaltung einer Metallplatte mit einer sper-
mienkopfförmigen Öffnung der DNS-Gehalt des ganzen Nu-
kleus mit einer Messung festgestellt werden konnte.

Die Kerngröße wurde durch Messung der Länge, des
größten Durchmessers (Breite) und der Basis mit dem
Okularmikrometer der Firma Zeiss bei Anwendung der
Van Duijn-Formel (3) errechnet.

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