VIe CONG. INTERN. REPROD. ANIM. INSEM. ARTIF., PARIS, 1968, VOL. Il MICROBISME DU MATERIEL CRYOGENIQUE Lottie Stegg — Docteur esSciences Faculté des Sciences - Caen. Francee Dans une note préliminaire nous avions soulevé le problème de la con- tamination possible de tous matériels immergés dans l'azote liquidee En effet, nos expériences ont prouvé que malgré le froid inten- se les germes apportés, tant par les récipients, pinces etCeo que par les contacts temporaires de l'Azote avec l'atmosphère conservent leur survie et toute leur virulencee Il est donc nécessaire et principalement dans le cas de la con- servation du sperme de taureau en vue de l'insémination artificielle, de protéger la semence ainsi que de vérifier périodiquement l'asepsie de l'Azote, des containers, gobelets pinces etCceso Nos premiers essais ont tous eu, pour but, de rechercher l'importance de la microflore qui pouvait persister pendant le stockage du sperme de taureaue Nous avons opéré suivant 3 procédés : Le premier consistait à immerger des cotons stériles au sein de l'A- zote, puis après évaporation effectuée à l'abri des contaminations at- mosphériques, il était procédé à l'analyse classique avec dilutionse Le deuxième consistait à prélever dans une pipette Pasteur ou dans une paillette stérile une quantité d'Azote qui était évaporé au sein même d'un milieu de culturee Le troisième, enfin, consistait à l'aide d'écouvillons stériles à gratter les surfaces internes des gobelets servant au stockage de la semence. Ces écouvillons étaient mis alors dans des tubes contenant du Ringer au 1/4 à partir desquels l’analyse était poursuiviee C'est ainsi que pour un grand container de stockage, ouvert fréquemment, nous avons numéré par le procédé n° | ! 48 he 7 jours Germes totaux sur milieu M.0.F. au mlosoece 60 4330 Moisissures (Mucor Pénicillium glaucum)oceo - 6 Pas de coliformes, ni d’anaérobies sulfito-réducteurs, pas de germes producteurs d'hydrogène sulfurée Pour un container plus petit par le procédé n° 2 nous avons trouvé $ 48 h. 7 jours Germes totaux sur milieu Mê0Æoonooooooooo. 41 303æ Moisissures (Pénicillium, Séotrichum)..…. - 3 Colifomes (Aerobac‘ters)................... 600 — 1163